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而对照组，用的则是生理盐水。
处理完毕后，就是进行血脑屏障通透性的动态监测，当然还得监测短链脂肪酸的含量变化。
监测方法，就相对而言比较复杂了。
与常规手法不同，许秋对小鼠进行了颅窗植入。
麻醉小鼠后，颅骨钻窗。
“直径3mm左右，定位在感觉皮层。”
许秋给出详细的位置。
一共16只小鼠，不可能让他一个人慢慢做过来。
太浪费时间。
因而，莫雷蒂、赖光圳等人都参与了进来，共同帮忙处理小鼠。
而完成钻窗过后，就是固定金属观察环、滴加人工脑脊液覆盖了。
至此，这一步处理完成。
随后就是进行荧光示踪剂注射。
相对前者来说，这个操作就很简单了。
直接在尾静脉注射FITC-右旋糖酐标记血管、注射罗丹明B标记细胞外间隙就行了。
没什么技术含量，研究生都能轻松驾驭。
“接下来，需要监测四项指标。”许秋说道。
其一，血脑屏障完整性。
这个很简单，直接用双光子实时成像血管渗漏就行。
第二，紧密连接蛋白Claudin-5。
Claudin-5是神经功能的守门人，从某种方面来说，血脑屏障的完整性与它有着密不可分的关系。
可以说，这个实验的重要指标，基本上都是靠Claudin-5验证的。
而检测Claudin-5本身，则是主要是靠免疫组化 Westernblot（脑微血管）。
随后，是小胶质细胞活化，在皮层进行Iba-1免疫荧光。
最后则是血清血脑屏障修复机制，利用气相色谱-质谱来判断，其涉及到了丁酸、乙酸的浓度，以及至关重要的Claudin-5基因敲除！
“这个方案……也做出了很多优化啊。”莫雷蒂有些愕然。
赖光圳等人也不禁点头，目中有着钦佩之色。
许秋的方法，和常规法子比起来，优势大上不少。
比如检验血脑屏障的完整性这一点。
常规手法，是监测分辨菌群的丰度。
而许秋则改换成了双光子实时成像血管渗漏，优点显而易见，便是可以动态观测血脑屏障修复过程。
其次，短链脂肪酸修复血脑屏障这一点，许秋对Claudin-5基因的敲除，堪称妙笔。
没有了Claudin-5基因，小鼠的血脑屏障应当会濒临崩溃。
此时补充短链脂肪酸，若是能够见到血脑屏障渗漏有所改善，则能证明，短链脂肪酸能够修复血脑屏障！
另外，监测小胶质细胞活化也有着巨大优势。
常规方法，只会在实验前、实验后查一次神经炎症。
但，活体小胶质细胞成像却可以实时追踪神经炎症消退。
这能清晰地反应阿克曼菌、短链脂肪酸等等在抗炎方面发挥的作用！
很快，各组实验小鼠都已然准备完毕。
第一件要做的事情，就是确定阿克曼菌已经定值成功，且血清丁酸上升。
经过检测，实验组的阿克曼菌，翻了将近七百倍。
而对照组用的是生理盐水，并无明显变化。
血清丁酸方面，实验组小鼠达到了85个单位，说明血清中丁酸含量已经达到可用的标准。
随后，是检测血脑修复的证据！
双光子成像显示，实验组渗漏面积比、与对照比相较而言，减少了百分之七十！
Claudin-5表达，Westernblot灰度值上升百分之一百五十！
而对照组，用的则是生理盐水。
处理完毕后，就是进行血脑屏障通透性的动态监测，当然还得监测短链脂肪酸的含量变化。
监测方法，就相对而言比较复杂了。
与常规手法不同，许秋对小鼠进行了颅窗植入。
麻醉小鼠后，颅骨钻窗。
“直径3mm左右，定位在感觉皮层。”
许秋给出详细的位置。
一共16只小鼠，不可能让他一个人慢慢做过来。
太浪费时间。
因而，莫雷蒂、赖光圳等人都参与了进来，共同帮忙处理小鼠。
而完成钻窗过后，就是固定金属观察环、滴加人工脑脊液覆盖了。
至此，这一步处理完成。
随后就是进行荧光示踪剂注射。
相对前者来说，这个操作就很简单了。
直接在尾静脉注射FITC-右旋糖酐标记血管、注射罗丹明B标记细胞外间隙就行了。
没什么技术含量，研究生都能轻松驾驭。
“接下来，需要监测四项指标。”许秋说道。
其一，血脑屏障完整性。
这个很简单，直接用双光子实时成像血管渗漏就行。
第二，紧密连接蛋白Claudin-5。
Claudin-5是神经功能的守门人，从某种方面来说，血脑屏障的完整性与它有着密不可分的关系。
可以说，这个实验的重要指标，基本上都是靠Claudin-5验证的。
而检测Claudin-5本身，则是主要是靠免疫组化 Westernblot（脑微血管）。
随后，是小胶质细胞活化，在皮层进行Iba-1免疫荧光。
最后则是血清血脑屏障修复机制，利用气相色谱-质谱来判断，其涉及到了丁酸、乙酸的浓度，以及至关重要的Claudin-5基因敲除！
“这个方案……也做出了很多优化啊。”莫雷蒂有些愕然。
赖光圳等人也不禁点头，目中有着钦佩之色。
许秋的方法，和常规法子比起来，优势大上不少。
比如检验血脑屏障的完整性这一点。
常规手法，是监测分辨菌群的丰度。
而许秋则改换成了双光子实时成像血管渗漏，优点显而易见，便是可以动态观测血脑屏障修复过程。
其次，短链脂肪酸修复血脑屏障这一点，许秋对Claudin-5基因的敲除，堪称妙笔。
没有了Claudin-5基因，小鼠的血脑屏障应当会濒临崩溃。
此时补充短链脂肪酸，若是能够见到血脑屏障渗漏有所改善，则能证明，短链脂肪酸能够修复血脑屏障！
另外，监测小胶质细胞活化也有着巨大优势。
常规方法，只会在实验前、实验后查一次神经炎症。
但，活体小胶质细胞成像却可以实时追踪神经炎症消退。
这能清晰地反应阿克曼菌、短链脂肪酸等等在抗炎方面发挥的作用！
很快，各组实验小鼠都已然准备完毕。
第一件要做的事情，就是确定阿克曼菌已经定值成功，且血清丁酸上升。
经过检测，实验组的阿克曼菌，翻了将近七百倍。
而对照组用的是生理盐水，并无明显变化。
血清丁酸方面，实验组小鼠达到了85个单位，说明血清中丁酸含量已经达到可用的标准。
随后，是检测血脑修复的证据！
双光子成像显示，实验组渗漏面积比、与对照比相较而言，减少了百分之七十！
Claudin-5表达，Westernblot灰度值上升百分之一百五十！